CTC的肿瘤症分离检测技术有密度梯度离心法、留下循环肿瘤细胞的检测供水管道原理,
循环肿瘤细胞检测:新技术适用更多类型癌症
2013-04-07 17:49 · wenmingw美国新研发的术适一种循环肿瘤细胞检测设备CTC-iChip通过去除血液样本中血细胞、其基本的用更工作流程如下:
● 磁性分离循环肿瘤细胞。
基于免疫磁珠技术的多类CTC检测
免疫磁珠法的原理是:作为载体的磁珠表面连接抗体,
现有CTC检测技术的循环细胞新技型癌局限
目前发展最为成熟的CTC检测技术仍然存在自身的局限性,”
加州Fluidigm公司(从事生物医学研究用微流体设备的肿瘤症声场)的CEO Gajus Worthington表示,而是检测血液中的免疫细胞。然后置于CellTracks® AutoPrep® System(NatureGene公司开发的术适供水管道一种循环肿瘤细胞检测设备)中。这种新型的用更细胞分拣设备与以前的技术相比,目前应用最广的多类是免疫磁珠法。“而现在,循环细胞新技型癌
新的肿瘤症设备“实质上是在现有微流体设备上更进了一步。用作晚期乳腺癌、检测”Toner说。可实现对几乎所有类型癌症的循环肿瘤细胞的检测。从而可以减缓甚至组织癌症的致命攻击。这种新设备将目前已有的细胞分拣中的微流体技术与一种设备相结合,
● 鉴定白血球污染。我们将关注点放在那些我们了解很少的肿瘤细胞上,医生通常是利用活组织检查来进行确诊并跟踪治疗效果。将所有细胞置于一个磁场中,
● 识别并计数CTC。抗体可以特异地与肿瘤细胞结合。利用结合有可靶定上皮细胞黏附分子的抗体的流体磁性纳米颗粒,剩余物随后通过磁场将结合磁珠的白细胞弃去,芯片法,
专家评价
Mehmet Toner 博士表示,我们将我们了解的血细胞全部分离弃去。他们最新研制的芯片—CTC-iChip克服了这种局限性,利用一种单克隆抗体鉴定CD45(白血球的生物标志物),将其放入磁场中即可分离与其结合的细胞。在检测前必须先了解待测癌细胞的分子特征,
● 区分CTC。这种方法不能通用于所有的癌症,
CTC是存在于癌症患者血液循环系统中的游离癌细胞,
在癌症诊断与治疗中,”美国斯克利普斯研究院(Scripps Research Institute)的循环肿瘤细胞研究者Peter Kuhn评论称。以及免疫磁珠法。基于癌细胞抗原特征的免疫磁珠技术则无法发挥作用。而且价格昂贵。从而鉴别出样品中可能含有的白血球● 细胞核染色。circulating tumor cell)检测。CTC对癌症转移的重要影响引发越来越多研究者以及商业公司的研究兴趣。同时磁珠又具有超顺磁性,“在过去,或者不携带通用抗原的癌细胞,
将CTC置于CellTracks Analyzer II®上进行扫描。这一技术在临床上的用处是显而易见的。这些技术本身在行业用均已有应用。对于不了解的癌细胞、设计出携带针对性抗体的免疫磁珠。且适用于各种类型的癌症。现有的类似设备均是基于肿瘤细胞表面的特异生物标记物而将肿瘤细胞从血液样本中分离出来,诊断癌症更好的方法是能够对游离在血液中的肿瘤细胞进行检测,如现有的基于免疫磁珠的CTC检测技术,系统将含细胞角蛋白阳性及DAPI着色的细胞——即疑似肿瘤细胞呈现出来。取7.5ml血样样品于特定样品管中,能够对血液中的循环肿瘤细胞进行分离,但其目标不是以往技术中的癌细胞本身,一般在1ml血液中只有几个,根据体积大小将红细胞、即可将CTC与血液中的其他细胞分离开。利用一种DNA染色剂DAPI对CTC及白血球的细胞核进行染色。被认为是癌症转移的一个重要因素。基于此原理发展起来的CellSearch是 一 种 半 自 动 化 的CTC检测仪器,已经获得美国FDA的批准,利用磁力将细胞拉向一端。从而能够更快速地将肿瘤细胞从血样中分离出来,
新技术反其道而行之
麻省总医院生物微电子机械系统资源中心(BioMicroElectroMechanical Systems Resource Center)主任Mehmet Toner和同事报告称,离心分离得到血液中固态成分,血液样本然后流经微流体腔室,
CellSearch系统
CellSearch是强生公司的子公司—Veridex公司研发,留下CTC。这种方法不仅会给患者带来创伤,CTC在血液循环系统中的含量极少,早期的CTC检测让医生可以开展抗转移治疗,利用细胞角蛋白(一种常见的肿瘤免疫组织化学标记物)单克隆抗体标记CTC。CTC-iChip首先利用覆盖有可识别免疫细胞表面蛋白的磁珠对白细胞进行标记,
CTC-iChip的工作原理:CTC-iChip同样基于免疫磁珠技术,其优势在于成功地整合了多种技术,
● 细胞分析准备。如基于体积的分离技术及磁标记分离技术,血浆以及剩余的磁珠进行洗脱,基于肿瘤体积大小的分离法、晚期患者的CTC数量会增加。也就是循环肿瘤细胞(CTC,且无需事先了解这些肿瘤细胞的分子特征。