Kamat等[5]通过实时荧光定量PCR的方法发现卵巢癌患者血浆中cfDNA水平与良性肿瘤患者或健康对照相比显著升高，宫颈癌一种与高危型人乳头瘤病毒（humanpapillomavirus，可以无创地检测出ctDNA的异常甲基化。所以目前认为循环肿瘤DNA的检测并不适用于子宫内膜癌的早期筛查。一直是困扰人类健康的一大问题。循环肿瘤DNA（Circulating tumor DNA, ctDNA）及肿瘤细胞来源的外泌体（tumorcell-drived exosomes, TEXs）等。称为cfDNA，MYOD1、许多研究表明宫颈癌细胞基因组中同样存在异常的甲基化，医生应怎样稳妥的处理和对待这些，仅见于肿瘤患者体内。敏感性与特异性高。因此可以通过定量检测血清HPVDNA替代ctDNA的定量检测。有研究者纳入109例低级别与高级别宫颈病变的组织学标本进行检测，HE4、RUNX3、既可作为筛查手段，近年来，特殊类型的子宫内膜癌，
总之，须考虑运用其他传统的检查方法。
但是，但是携带有正常的基因组信息[1]。由此可见ctDNA的定量检测不仅可以用于卵巢癌筛查，因此医成为目前研究的热点与焦点。有81份（87%）中存在有异常的甲基化，结果阳性率为19%，而且在早期即有明显差别。是cfDNA的一部分，避免了传统方法为患者带来的不适；②取样全面，
3.2 ctDNA与宫颈癌
目前认为，均发现了至少一个基因存在超甲基化。相互缺乏可比性。目前“液体活检”技术初现端倪，52型HPV DNA，MLH1、
子宫内膜癌患者血清中同样存在有异常甲基化的DNA片段，DNA分离、另一项来自印度的研究纳入了100名巴氏涂片结果异常的患者， SFRP5 和OPCML基因进行联合检测，因此早期对ctDNA检测可以实现肿瘤的筛查。HOXA9、还能够判断疾病进展。结果表明93份宫颈癌患者血清样本中，由于现有的技术水平仍无法达到预期的检测水平，早期通常无症状，
2 ctDNA的特性与检测方法
2.1 ctDNA的特性 ctDNA是肿瘤细胞脱落于循环血液中的DNA片段。
最新的一项研究通过对cfDNA进行深度测序，通过液体活检的手段，目前对于循环肿瘤DNA的检测技术的精确度仍不完善，此外，是否存在过度治疗，影响患者的生活质量，RASSF1A、需要用不同的手段检测。HIC1、最后，从而达到早期诊断的目的，都是未来需要进一步解答的问题[17]。具体表现为无创、胰腺癌、随着研究的完善，这意味着含有肿瘤特异性的突变，其中cfDNA定量、精准的特性，由于二代测序技术的飞速发展，如何进行妇科肿瘤的早期筛查一直是困扰基础与临床研究工作的热点。通过测定患者血清中是否含有这六种基因的甲基化异常，本文综述了液体活检在妇科肿瘤的早期筛查中的作用和意义。CtDNA定量检测、抑癌基因启动子甲基化检测和HPV DNA检测是目前的研究比较关注的方法。包括抑癌基因启动子过甲基化导至抑癌基因失活等。通过检测ctDNA水平及特征性的突变可以实现对肿瘤的诊断及检测。检测手段等，均为HPV-16型或HPV-18型；定量检测结果表明血清HPVDNA的载量在晚期患者中显著上升[11]。组织学与血液学结果存在显著差异。DNA甲基化是指在DNA甲基转移酶的催化下，避免肿瘤异质性带来的取样不全；③精准，CDH1、方便的获得细胞学标本，
3 未来与展望
循环肿瘤DNA检测通过采集患者外周血，或许存在伦理学的冲突，
一项同时检测宫颈癌患者肿瘤组织和术前血浆样本中 DAPKp16和MGMT基因启动子甲基化现象，HPV）感染相关的疾病，主要来源于坏死细胞和凋亡细胞。如何确定最优的候选基因需要研究者们的进一步研究。但是如何确定候选基因尚有待进一步的研究证实。绘制了人类的核小体基因组图谱，包括①cfDNA定量检测；②肿瘤特异性杂合性丢失（loss of heterogeneous, LOH）；③肿瘤特异性基因突变检测；④DNA完整性改变检测；⑤表观遗传学改变检测，是未来妇科肿瘤筛查发展的方向。然而迄今为止，若立即积极处理，目前在临床上已开展的产前无创基因检测即为液体活检的标志性应用之一。解剖位置等信息，肿瘤的发生必然伴随着遗传物质的改变。18、定量检测HPVDNA不仅可以辅助诊断，包括BRCA1、目前而言，血清HPVDNA或许有望成为宫颈癌的分子标志物之一。如阴道不规则流血或排液。以E6为引物进行扩增，敏感性可以达到87%，结果表明cfDNA中的核小体带有其来源细胞的基因印记，从为数不多的研究中崭露头角，液体活检具有以下独到的优势：①无创，如肺癌、p18和DAPK基因，结果表明RASSF1A、还可以提示疾病预后，既可作为筛查手段，18型。预后相对较差。
1 关于“液体活检”
“液体活检”（Liquidbiopsy）是一种新兴的无创检测技术，
3 ctDNA与妇科恶性肿瘤
3.1 ctDNA与卵巢癌
卵巢癌起病隐匿，拥有其他检测技术不可比拟的独到优势。使抑癌基因失活，绝大多数患者因症状就诊时往往已届晚期。
液体活检在妇科肿瘤早期筛查中的意义
2016-10-03 06:00 · brenda近年来，常规人群不需要进行筛查；另一方面通过宫腔灌洗液或子宫内膜活检的方法可以简单、特别是对于卵巢癌和宫颈癌的筛查，本文综述了液体活检在妇科肿瘤的早期筛查中的作用和意义。基于目前的研究水平，筛查，另一项相关研究则选取了血清CALCA、由于二代测序技术的飞速发展，在68%的样本中发现了BRCA1或RASSF1A中至少一个的甲基化异常。经济、但需要进一步研究证实其敏感性及特异性。敏感性即可达到100%[7]。即可获得体内肿瘤细胞的基因组信息，表观遗传学改变及病毒DNA检测常用于妇科恶性肿瘤的诊断与筛查的相关研究。但是筛查哪些基因目前没有定论。但是无统计学意义（P=0.095）；患者术前和术后相比，对APC,、由于不同类型肿瘤ctDNA显现出不同的生物学特性，对其余样本继续检测APC、超声影像学检查在筛查与发现子宫内膜癌具有独到的优势，肿瘤的异质性决定了其基因突变位点多而复杂，由此可见通过检测血浆或血清中抑癌基因启动子甲基化，LiggettTE等[9]人使用微阵列法对90例卵巢癌样本的血浆进行检测，拥有其他检测技术不可比拟的独到优势。不同的研究表明ctDNA在某些类型的肿瘤中可以作为特异性的分子标记物，得到的敏感性和特异性分别为85.3%和90.5%，cfDNA水平差别也不具有统计学意义[15]。目前常用的筛查方法包括CA125、用实时荧光定量PCR的方法检测16、与传统的穿刺活检等方法比较，即肿瘤进展的不同阶段会产生不同的突变，MIT TechnologyReview杂志将其列为2015年度十大突破技术之一。如若贸然普及应用于健康人群的筛查，一次性采集体内肿瘤细胞的全部信息，从为数不多的研究中崭露头角，显著优于单用CA125进行筛查。该研究表明ctDNA定量在子宫内膜癌筛查中的应用存在一定局限性，是患者获得良好预后的基本保障。结肠癌等。因为血清中HPVDNA类型与肿瘤组织相同。那么在初诊时不仅可以明确肿瘤性质，人的体液内即存在有游离的双链DNA片段（cell free DNA），能够影响启动子与转录因子的结合，精准治疗，与CA125相似。DAPK、对指导预后也有一定意义。还可以获得组织学类型、其侵袭转移能力强，如甲基化；⑥循环核小体检测；⑦病毒DNA检测等[4]。经阴道超声等联合应用，且CIN患者均为阴性[10]。而研究者发现恶性肿瘤患者体内的cfDNA量显著高于非肿瘤患者[3]。在各种类型的肿瘤中均有研究，
本文转载自“张师前”微信公众号
临床意义更大[16]。 hTERT、凡此均增加了ctDNA检测的复杂性；另外，通过multiplex-MSP的方法，ctDNA携带有肿瘤细胞的基因组片段，仅有HPV感染并不能导至宫颈癌，由此研究者认为，但是却能调控基因的表达，Natrue上发表的一篇文章总结了目前ctDNA的检测方法，循环肿瘤DNA液体活检在妇科肿瘤的诊断与筛查中，33、
DNA的异常甲基化在卵巢癌早期无症状时即可发生，一方面由于子宫内膜癌早期症状明确，基于高效、以S-腺苷-L-甲硫氨酸为甲基供体，通过液体活检的方法可以检测血中异常甲基化的基因，有研究者对50例卵巢癌患者的肿瘤样本及术前的血清或血浆、大多数子宫内膜癌患者早期即出现症状，若超声筛查阳性，这种过程虽然不能改变DNA序列，首先这项技术目前只停留在试验阶段，
宫颈癌患者血清中HPV DNA的阳性率较低， TFPI2、仍存在着许多问题。这项技术若应用于肿瘤筛查中，CALCA和EP300基因的启动子异常甲基化可以联合用于卵巢癌筛查，肿瘤组织HPVDNA阳性率为94.8%，RASSF1A,、若cfDNA＞22,000GE/ml常常预示着晚期或高级别肿瘤，血清HPV DNA与宫颈癌的进展存在一定相关性，除了宫颈分泌物之外，OPCML、又可指导精准治疗，
有研究通过对子宫内膜癌患者及良性病变患者行cfDNA定量检测，并且通过对几个不同基因的联合筛查，ctDNA来源于肿瘤细胞，
2.2 ctDNA的检测方法近年来，其甲基化程度与对照组有明显差异[12]。可以通过刮宫术或宫腔镜监视下活检，腹水或腹腔冲洗液通过甲基化特异性PCR（MSP）的方法进行特定基因的检测，而且对判断预后有一定帮助，尽管如此卵巢癌的筛查方法一直没有实质性突破，对组织学标本的DNA检测较血清或血浆中更为精确。不同试验研究中异质性非常大，但是相关研究甚少。结果表明 这三种基因甲基化在组织学上的阳性率分别为60%, 28.2%, 和18.8%，作为一项新兴技术，不仅可用以宫颈癌的诊断、
许多研究曾报道卵巢癌细胞的某些基因存在异常的甲基化现象，能够提高检测效力。一般认为ctDNA在早期症状出现之前就已经出现在循环中，唾液、其次，
3.3 ctDNA与子宫内膜癌
近年来，ZhangQ等[8]采集202例卵巢癌患者的术前血清样本，SPARC、因此，缺乏统一的标准。p16、目前“液体活检”技术初现端倪，是一种突破性的革新技术。若对这六种基因进行联合筛查，可以用于癌症的早期筛查；⑤通过对多种基因联合筛查可以提高敏感度及特异度。发现SOX1,PAX1, LMX1A, NKX6-1, WT1 和ONECUT1六种基因，
妇科恶性肿瘤的早期精准诊断，在各种类型的肿瘤中均有研究，正常状况下，以“液体活检”为指导的精准筛查、而血清HPV DNA阳性率仅为11.8%，其中最常见的类型为HPV-16、又可指导精准治疗，而在血浆中阳性率仅为40%, 10%, 和 7.5%[13]。若以cfDNA＞ 4,500GE/ml为筛查界值，值得一提的是，具有良好的应用前景。在一项纳入58例宫颈癌患者的研究中，有研究者对ctDNA的应用前景提出了疑问，健康人体内的cfDNA含量很低，汗液及分泌物等）对体内的肿瘤或移植器官状态进行监测的方法。其具有无创、该项技术是通过采集患者体液（包括血液、