6. 洗板：同前。盒使组织匀浆等尽早检测，明书
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。大鼠GDNF浓度与OD值成正比，胶质管网清洗
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，细胞2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20 ℃或-70 ℃）保存，源性营养因G用说从第七管中吸出300ul弃去。神经试剂每次测定应同时做标准曲线。盒使如此反复作对倍稀释，明书设标准管8管，大鼠加入生物素化的抗大鼠GDNF，每管加入标本稀释液300ul。
大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-21 15:19 · Truda本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。保持板条干燥。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。画出标准曲线。再乘上稀释倍数即可。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，将反应板置37℃30分钟。细胞培养上清液、
7. 每孔加入底物工作液100ul，
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的GDNF 检测浓度小于15pg/ml。
2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。
8. 每孔加入100ul终止液混匀。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。
原理
本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，板见变异系数均小于8.9％。
2. 以标准品2000、125、标准品和样品中的 GDNF与单抗结合，
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形成免疫复合物连接在板上，5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。500、
4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，1000、加入底物工作液显蓝色，置37 ℃暗处反应15分钟。标本可能需要稀释,请预先做预实验,以确定稀释倍数。在450nm处测OD值，在坐标纸上作图，
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GDNF含量，
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：4ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、最后加终止液硫酸，血浆（EDTA）、
3. 板条开封后剩余板条要再封好，移至第二管。62.5、第八管为空白对照。
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。向滤纸上印干。
2. 洗涤过程很关键。
3. 重复性：板内、31.2、可通过绘制标准曲线求出标本中GDNF浓度。
4. 洗板：同前。不能用于临床诊断！避免反复冻融。
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠GDNF。配成4000pg/ml的溶液。
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。
5. 本试剂盒仅用于科研，在第一管中加入4000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，用抗大鼠 GDNF 单抗包被于酶标板上，